原理：活細(xì)胞中的線粒體脫氫酶能將 MTT（四唑鹽）還原成不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜，并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。通過(guò)測(cè)定甲臜在特定波長(zhǎng)下的吸光度，可反映細(xì)胞的活性和數(shù)量。

操作：將細(xì)胞接種到 96 孔板中，培養(yǎng)一段時(shí)間后加入 MTT 溶液，繼續(xù)孵育。然后去除上清液，加入二甲基亞砜（DMSO）溶解甲臜，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和藥物篩選等實(shí)驗(yàn)。

原理：與 MTT 法類似，細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶可以將 CCK - 8 試劑中的 WST - 8 還原成水溶性的橙黃色甲臜?；罴?xì)胞數(shù)量與甲臜生成量成正比，通過(guò)檢測(cè)吸光度來(lái)衡量細(xì)胞活性。

操作：將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板，加入 CCK - 8 溶液，孵育后直接用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。

應(yīng)用：廣泛應(yīng)用于細(xì)胞活性檢測(cè)、細(xì)胞增殖分析、藥物篩選等領(lǐng)域。該方法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，且無(wú)需裂解細(xì)胞。

原理：利用一些熒光染料對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行特異性染色。例如，Calcein - AM 可被活細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解，產(chǎn)生綠色熒光，而死細(xì)胞由于酯酶活性喪失，不能產(chǎn)生熒光；碘化丙啶（PI）只能進(jìn)入死細(xì)胞，與 DNA 結(jié)合后發(fā)出紅色熒光。通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察和分析。

操作：將細(xì)胞與熒光染料孵育，然后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

應(yīng)用：可用于區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞，以及對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定量分析，常用于細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等研究。

原理：ATP 是細(xì)胞內(nèi)的能量貨幣，活細(xì)胞中含有大量 ATP，而死細(xì)胞中的 ATP 會(huì)迅速降解。通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) ATP 的含量，可反映細(xì)胞的活性。

操作：使用熒光素 - 熒光素酶試劑盒，該試劑盒中的熒光素在熒光素酶和 ATP 的作用下會(huì)發(fā)出熒光，熒光強(qiáng)度與 ATP 含量成正比。將細(xì)胞裂解后加入試劑盒試劑，用熒光檢測(cè)儀測(cè)定熒光強(qiáng)度。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞活性檢測(cè)、細(xì)胞增殖分析以及藥物對(duì)細(xì)胞代謝的影響等研究。