正確儲(chǔ)存：SafeGreen 核酸染料對(duì)儲(chǔ)存條件有要求，需嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書存放，一般應(yīng)避光、低溫（如 4℃）保存。若儲(chǔ)存不當(dāng)，如暴露在強(qiáng)光下或高溫環(huán)境中，可能導(dǎo)致染料分解、變質(zhì)，影響染色性能。定期檢查染料的儲(chǔ)存狀態(tài)，避免使用過期或出現(xiàn)沉淀、變色等異常的染料，確保染料質(zhì)量穩(wěn)定。

濃度確認(rèn)與稀釋：使用前，確認(rèn)染料的濃度標(biāo)識(shí)，常見的是 10,000× 濃度的儲(chǔ)液。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，準(zhǔn)確稀釋染料。例如，在膠染法中，每 50 mL 瓊脂糖溶液需加入 5 μL 10,000× 濃度的 SafeGreen 染料儲(chǔ)液，確保稀釋比例精確，避免因濃度過高或過低影響染色效果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性 。

膠染法：制備瓊脂糖凝膠時(shí)，待瓊脂糖溶液熔化并冷卻至 50 - 60℃，再加入染料，防止高溫破壞染料活性。加入染料后，充分?jǐn)嚢杌靹颍苊饩植繚舛炔痪?。倒入制膠模具時(shí)，動(dòng)作平穩(wěn)，防止產(chǎn)生氣泡影響凝膠質(zhì)量。凝膠凝固后，放入電泳槽，加入適量電泳緩沖液，確保凝膠浸沒且液面高度合適，避免電泳過程中出現(xiàn)異常 。

泡染法：電泳結(jié)束后，小心取出凝膠，避免損壞。配制染色液時(shí)，將 10 μL 10,000× 濃度的 SafeGreen 染料加入到 100 ml 1×TAE 或 0.5×TBE 緩沖液中，確保染色液濃度準(zhǔn)確。將凝膠浸沒在染色液中，室溫下輕輕振蕩孵育 30 - 60 分鐘，根據(jù)凝膠厚度、瓊脂糖濃度以及核酸片段大小適當(dāng)調(diào)整染色時(shí)間，保證染色充分且不過度 。

樣品處理：處理核酸樣品時(shí)，避免樣品污染，使用無菌、無核酸酶的器具。將 DNA 樣品與上樣緩沖液混合時(shí)，確?；旌暇鶆?，防止因樣品分布不均導(dǎo)致電泳條帶異常。加樣時(shí)，用移液器小心操作，避免產(chǎn)生氣泡，且將樣品準(zhǔn)確加入凝膠的加樣孔中，防止樣品溢出或加樣量不準(zhǔn)確 。

電泳條件控制：根據(jù)核酸片段大小設(shè)置合適的電壓和電泳時(shí)間，一般電壓為 100 - 150V，時(shí)間為 30 - 60 分鐘，但需依據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。電壓過高或時(shí)間過長(zhǎng)，可能導(dǎo)致核酸條帶擴(kuò)散、變形；電壓過低或時(shí)間過短，則可能使核酸分離不充分，影響結(jié)果判斷。在電泳過程中，保持電泳槽溫度穩(wěn)定，避免因溫度變化影響核酸遷移率 。

成像系統(tǒng)校準(zhǔn)：使用藍(lán)光切膠儀或紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察凝膠前，確保儀器經(jīng)過校準(zhǔn)，保證激發(fā)光源強(qiáng)度、成像分辨率等參數(shù)準(zhǔn)確。定期對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)和校準(zhǔn)，避免因儀器誤差導(dǎo)致核酸條帶的熒光強(qiáng)度、位置等數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。

參數(shù)設(shè)置合理：在成像過程中，根據(jù)染料的特性和樣品情況，合理設(shè)置曝光時(shí)間、增益等參數(shù)。曝光時(shí)間過長(zhǎng)可能導(dǎo)致條帶過亮、背景增高；曝光時(shí)間過短則可能使條帶信號(hào)弱，難以準(zhǔn)確分析。通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳參數(shù)，確保獲得清晰、準(zhǔn)確的核酸條帶圖像 。